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電動離心機在生物科學(xué)上有些什么應(yīng)用
更新時間:2016-02-16 點擊次數(shù):2212
離心機離技術(shù)是根據(jù)顆粒在一個實用離心場合中的狀態(tài)而發(fā)展起來的新技術(shù)。不同密度、大小或形狀的顆粒在不同速度的離心場合中沉降,所以一個大體是球形非均一的混合物,可以用離心的方法加以分離,離心機是為了進一步研究生物化學(xué)、分離的物質(zhì)。例如收集細胞、分離血漿,從這些預(yù)純化的制劑中分離DNA和蛋白質(zhì)分子,并可分離出病毒以及大規(guī)模大腸桿菌、嚴細胞成分、核蛋白微粒等。
電動離心機有一個繞本身軸線高速旋轉(zhuǎn)的圓筒,稱為轉(zhuǎn)鼓,通常由電動機驅(qū)動。懸浮液(或乳濁液)加入轉(zhuǎn)鼓后,被迅速帶動與轉(zhuǎn)鼓同速旋轉(zhuǎn),在離心力作用下各組分分離,并分別排出。通常,轉(zhuǎn)鼓轉(zhuǎn)速越高,分離效果也越好。
電動離心機采用旋轉(zhuǎn)離心力使溶液中物質(zhì)分層分離。該儀器采用無級調(diào)速和自動調(diào)節(jié)平衡裝置,具有運轉(zhuǎn)平穩(wěn)、體積小、造型美觀、溫升低、使用效率高以及適用性廣等優(yōu)點。特制鋁合金離心轉(zhuǎn)盤,確保離心管不易損壞。該儀器廣泛用于醫(yī)院、化學(xué)以及生物化學(xué)實驗室對血清、血漿、免疫等作定性分析實驗。
電動離心機在生物科學(xué)上的應(yīng)用已經(jīng)不在是大驚小怪的事了,離心技術(shù)在生物科學(xué),特別是在生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究領(lǐng)域,早已起到重要的作用,每個生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗室以及各類高校都要安裝多種型式的高速離心機。離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度。
一般情況下,低速離心時常以轉(zhuǎn)速“rpm”來表示,高速離心時則以“g”表示。計算顆粒的相對離心力時,應(yīng)注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心的距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報告超離心條件時,通??偸怯玫匦囊Φ谋稊?shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,因為它可以真實地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動態(tài)變化??萍嘉墨I中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值(RCFav),即離心管中點的離心力。
為便于進行轉(zhuǎn)速和相對離心力之間的換算,Dole和Cotzias利用RCF的計算公式,制作了轉(zhuǎn)速“rpm”、相對離心力“RCF”和旋轉(zhuǎn)半徑“r”三者關(guān)系的列線圖,圖式法比公式計算法方便(列線圖參見附錄)。換算時,先在r標尺上取已知的半徑和在rpm標尺上取已知的離心機轉(zhuǎn)數(shù),然后將這兩點間劃一條直線,與圖中RCF標尺上的交叉點即為相應(yīng)的相對離心力數(shù)值。注意,若已知的轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標尺的右邊,則應(yīng)讀取RCF標尺右邊的數(shù)值,轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標尺左邊,則應(yīng)讀取RCF標尺左邊的數(shù)值。